Фенилметилсульфонил фторид
| Фенилметансульфонил флюорид (PMSF) | |
|---|---|
  | |
| Приведены данные для стандартных условий (25 °C, 100 кПа), если не указано иное. |
В биохимии фенилметан сульфонил фторид или фенилметилсульфонил фторид (англ. PMSF, сокращение от англ. phenylmethane sulfonyl fluoride или phenylmethylsulfonyl fluoride) — ингибитор сериновых протеаз, широко используемый при выделении белковых экстрактов из различных клеток. PMSF не ингибирует всех сериновых протеаз[источник?] . Он быстро разрушается в воде, поэтому в исходных ("стоковых") растворах в качестве растворителя, как правило, используется безводный этанол, изопропанол, кукурузное масло или ДМСО. Ингибирование протеолитических ферментов происходит при концентрации PMSF в диапазоне от 0,1 до 1 миллимоль. Период полужизни в водных растворах (при 25 °С) составляет 110 минут при pH 7, 55 минут при рН 7,5 и 35 минут при рН 8.[1]
PMSF специфично связывается сериновыми остатками актиного центра в сериновых протеазах, однако, не связывает каких-либо других остатков серина в ферменте. Это является следствием гиперактивности этого серинового остатка, вызванного специфическими условиями окружающей среды в активном центре фермента. Поскольку PMSF, ковалентно связывается с ферментом, комплекс может быть визуализирован с помощью рентгеновской кристаллографии; следовательно, PMSF может использоваться в качестве химической метки для идентификации серина в активном центре в фермента.
- Фермент_(активный)-Ser-O-H + F-SO2СН2С6H5 → Фермент-Ser-O-SO2СН2С6H5 + HF
- Сериновая протеаза + PMSF → необратимый комплекс Фермента-PMS + HF
ЛД50 составляет менее 500 мг/кг[2]. PMSF является цитотоксическим химикатом, работа с которым должна проводиться только в вытяжном шкафу.
Примечания[править]
- ↑ GT James. Inactivation of the protease inhibitor phenylmethylsulfonyl fluoride in buffers (англ.) // Analytical Biochemistry[англ.] : journal. — 1978. — Vol. 86, no. 2. — P. 574—579. — doi:10.1016/0003-2697(78)90784-4. — PMID 26289.
- ↑ Roche Applied Science. The Complete Guide for Protease Inhibition. https://iti.stanford.edu/content/dam/sm/iti/documents/himc/immunoassays/ProteaseInhibitionGuide.pdf Архивная копия от 17 мая 2017 на Wayback Machine
См. также[править]
Серпины — группа белков-ингибиторов сериновых протеаз.